شاخص قدرت وابسته

وابستگی زمانی از شاخص آنتی اکسیدان کاهش دهنده آهن (FRAP) در سیب های شیلی و بیرگان

کارولینا هنریکز ، کامیلو لوپز-آلاران ، ماریتزا گومز ، ماریان لوتز ، هرنن اسپیسکی

دانشکده داروسازی ، دانشگاه والپاراسو ، شیلی. دانشکده شیمی ، دانشگاه کاتولیک پونتیفیکال شیلی ، سانتیاگو ، شیلی. انستیتوی تغذیه و فناوری مواد غذایی ، دانشگاه شیلی ، سانتیاگو ، شیلی. مرکز منطقه ای مطالعات غذایی سالم (CREAS) ، والپاراسو ، شیلی

ما فرض می کنیم که سنجش قدرت Rearioxidant Ferric (FRAP) که ترکیبات موجود را دنبال می کنند. ما در انواع میوه های توت شیلی (زغال اخته ، توت سیاه ، تمشک و توت فرنگی) و سیب (Cv. فوجی ، مادربزرگ اسمیت ، بانوی صورتی ، قرمز خوشمزه و گالا) اندازه گیری شد. با توجه به وابستگی FRAP به دوره زمانی واکنش ، ما پیشنهاد می کنیم شاخص های FRAP را بعد از 1 دقیقه (FRAP-1) ، 30 دقیقه (FRAP-30) و 120 دقیقه (FRAP-120) جوجه کشی اندازه گیری کنیم. بیشتر عصاره های میوه ارتباط معنی داری بین ظرفیت آنتی اکسیدانی و زمان جوجه کشی نشان دادند ، اگرچه در جمع های فرعی ، شاخص های FRAP با کل فنولیک ها و/یا آنتوسیانین ها ارتباط ندارند. در حقیقت ، در سیب و انواع توت ها تصحیح بین محتوای آنتوسیانین ها و شاخص های FRAP که با زمان جوجه کشی تصمیم می گیرند. نتیجه گیری شده است که عصاره های Frouit مورد تجزیه و تحلیل به یک دوره جوجه کشی بالاتر از تأسیس در پروتکل آزمایشی اصلی برای رسیدن به تعادل ، به دلیل شاهد مخلوط پیچیده ترکیبات آنتی اکسیدانی نیاز دارند. علاوه بر این ، به مشخصات جنبشی باید در هر نمونه مورد مطالعه برای ایجاد مناسب ترین دوره جوجه کشی برای تیتراژ تمام گونه های آنتی اکسیدانی واکنشی انجام شود.

کلمات کلیدی: frap ، beerries ، سیب ، ظرفیت آنتی اکسیدانی ، زمان جوجه کشی

تأثیر زمان جوجه کشی بر ظرفیت آنتی اکسیدانی که با توجه به FRAP اندازه گیری می شود ، در سیب های شیلی و انواع توت ها

پیشنهاد شده است که آزمایش ظرفیت میوه آنتی اکسیدانی ، با توجه به قدرت کاهش آهن (FRAP) اندازه گیری شود ، که از واکنش آهن 3+ -TPTZ به 593 نانومتر پیروی می کند ، ظرفیت آنتی اکسیدانی را دست کم می گیرد ، زیرا زمان واکنش (4 دقیقه) برای همه ترکیبات کاهش دهنده موجود در نمونه ها کافی نخواهد بود. ظرفیت آنتی اکسیدانی FRAP ، محتوای فنل ها و آنتوسیانین ها در انواع توت های مختلف (زغال اخته ، بلک بری ، تمشک و توت فرنگی) و سیب (CV. فوجی ، مادربزرگ اسمیت ، بانوی صورتی ، قرمز Delicio و Royal Gala) مورد بررسی قرار گرفت. با در نظر گرفتن وابستگی زمان جوجه کشی در مقدار FRAP ، پیشنهاد می شود که شاخص های FRAP بعد از 1 دقیقه (FRAP-1) ، 30 دقیقه (FRAP-30) و 120 دقیقه (FRAP-120) اندازه گیری شود. عصاره های مختلفی از میوه های تجزیه و تحلیل شده ارتباط معنی داری بین ظرفیت آنتی اکسیدانی و زمان جوجه کشی نشان داد. با این حال ، در بعضی موارد شاخص های FRAP با محتوای فنل های کل و/یا آنتوسیانین ها ارتباط ندارند. در واقع ، در سیب و انواع توت ها ارتباط بین محتوای آنتوسیانین ها و شاخص های FRAP با زمان جوجه کشی کاهش یافته است. نتیجه گیری شده است که عصاره های مورد بررسی به دلیل وجود مخلوط پیچیده از ترکیبات آنتی اکسیدان ، نیاز به زمان جوجه کشی بیشتری نسبت به پروتکل تحلیلی اصلی برای دستیابی به تعادل دارند. علاوه بر این ، مشخصات جنبشی هر نمونه باید برای ایجاد مناسب ترین دوره جوجه کشی برای نگه داشتن کلیه گونه های آنتی اکسیدانی واکنشی مورد بررسی قرار گیرد.

واژه های کلیدی: FRAP ، انواع توت ها ، سیب ، ظرفیت آنتی اکسیدانی ، زمان جوجه کشی

دریافت شده: 01/06/2011

پذیرفته شده: 06/08/2011

مقدمه

مطالعات اپیدمیولوژیک و کارآزمایی های بالینی ثابت کرده است که مصرف زیاد رژیم غذایی میوه و سبزیجات با کاهش خطر ابتلا به برخی از بیماری های مزمن ، از جمله چندین نوع سرطان ، بیماری های قلبی عروقی ، دیابت و سایر بیماری های دژنراتیو یا مرتبط با سن همراه است (1،2). این انجمن ها ممکن است تا حدودی به وجود مواد مغذی آنتی اکسیدانی و فیتوشیمیایی ها ، مانند ترکیبات مختلف فنلی که در محافظت از سلول ها در برابر آسیب اکسیداتیو ناشی از اکسیژن واکنش پذیر و گونه های نیتروژن کمک می کنند ، نسبت داده شود. سیب و انواع توت ها به دلیل وجود پلی فنول ها (عمدتا فلاونوئیدها) و اسیدهای فنولیک ، از جمله سایر آنتی اکسیدان ها (6-11) در بین میوه ها با ظرفیت آنتی اکسیدانی بالاتر (4،5) قرار دارند. مطالعات اپیدمیولوژیک نشان می دهد که مصرف سیب و انواع توت ها به دلیل بروز این ترکیبات فعال زیستی (8،12-14) با چندین اثر خطرناک همراه است.

در سالهای اخیر ، چندین روش آزمایشگاهی برای تعیین ظرفیت کل آنتی اکسیدانی میوه ها ، سبزیجات و نوشیدنی ها پیشنهاد شده است (15). سنجش در شیمی آنها (تولید رادیکال های مختلف و/یا مولکول های هدف) متفاوت است و نقاط پایانی اندازه گیری شده (16). در میان تکنیک های مختلف موجود ، روش توسعه یافته توسط بنزی و کرنش (17) به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرد و شاخص FRAP (کاهش قدرت آنتی اکسیدانی) مربوط به ظرفیت نمونه برای کاهش گونه های آهن را ارائه می دهد. این روش با تبدیل آن به یک فرم آهنی با رنگ آبی (λ = 593 نانومتر) (Fe 2+ -tptz) ، کاهش مجتمع Fe 3+ -Tripyridyltriazine (Fe 3+ -TPTZ) را ارزیابی می کند. این روش در ابتدا برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی پلاسما استفاده شده است ، و اکنون در حال حاضر در غذاها و عصاره های گیاهی (1618-20) به کار می رود. پروتکل آزمایشی تعیین می کند که زمان جوجه کشی 4 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد یک شرط مناسب برای سنجش ظرفیت کل آنتی اکسیدانی اکثر نمونه ها است ، زیرا واکنش های ردوکس آنقدر سریع پیش می روند که در این دوره تکمیل می شوند. با این حال ، مقادیر FRAP بسته به مقیاس زمانی تجزیه و تحلیل ممکن است بسیار متفاوت باشد (15،18). ما این فرضیه را بررسی کردیم که کاربرد استاندارد سنجش FRAP ظرفیت آنتی اکسیدانی را دست کم می گیرد زیرا دوره جوجه کشی به اندازه کافی طولانی نیست که بتواند تمام ترکیبات کاهش دهنده موجود در نمونه های غذایی را تیتراژ کند.

بنابراین ، اهداف مطالعه حاضر عبارتند از: 1) ارزیابی ظرفیت آنتی اکسیدانی سیب های مختلف با استفاده از روش استاندارد FRAP ، 2) برای پیشنهاد و استفاده از شاخص های FRAP جدید ، بسته به زمان واکنش امکان تشکیل Fe 2+-tptzعلاوه بر این ، همبستگی بین محتوای آنتی اکسیدان ها (فنلیک ها و آنتوسیانین ها) و شاخص های FRAP ارزیابی می شود.

مواد و روش ها

انواع توت های مورد مطالعه عبارتند از: زغال اخته (Vaccinium corymbosum) (Cv. Duke) ، توت سیاه (Rubus Ulmifolius) (CV. Cherokee) ، تمشک (Rubus idaeus) (CV. میراث) و توت فرنگی (Factaria ananansa) (CV Camarosa). ارقام Apple (Malus domestica) مورد مطالعه قرار گرفتند: فوجی ، مادربزرگ اسمیت ، بانوی صورتی ، قرمز خوشمزه و سلطنتی گالا. تمام سیب ها و انواع توت ها در مرحله رسیده ، در یک مزارع تجاری واقع در شیلی مرکزی (عرض جغرافیایی 34º 41 'تا 36º 33) برداشت شدند. تمام نمونه ها برای از بین بردن میوه های آسیب دیده ، بیمار یا با کیفیت پایین ، به دست آمده نمونه هایی که از نظر اندازه ، بلوغ و رنگ یکنواخت بودند ، طبقه بندی شدند. میوه های انتخاب شده تا زمان تجزیه و تحلیل (طی 2 ماه) در دمای 20 درجه سانتیگراد ذخیره شدند. میزان رطوبت هر نمونه از نظر گرانشی با اختلاف وزن پس از گرم شدن نمونه در دمای 70 درجه سانتیگراد به مدت 16 ساعت در یک فر تعیین شد (21).

تهیه نمونه

سیب: عصاره پوست سیب و خمیر از حداقل ده میوه به طور تصادفی انتخاب شده که با دقت در محله ها بریده شده بودند ، به دست آمد و دانه ها و هسته آنها را از بین برد. پوست (قسمت بدون خمیر) با بریدن میوه با پوست سبزیجات از جنس استنلس استیل بدست آمد. خمیر (بخشی بدون پوست) از میوه های پوست کنده شده به قطعات کوچک بریده شد ، به استثنای هسته و دانه ها.

روش استخراج اعمال شده برای هر روش به شرح زیر بود (7،22):

الف) فنلیک: 10 گرم بافت سیب به حلال استخراج 90 میلی لیتر اضافه شد (استون: آب 70:30).

ب) FRAP و آنتوسیانین ها در پوست سیب: نمونه 10 گرم به حلال استخراج 30 میلی لیتر اضافه شد.

ج) FRAP و آنتوسیانین ها در خمیر سیب: نمونه 20 گرم به حلال استخراج 60 میلی لیتر اضافه شد.

در همه موارد ، مخلوط ها به مدت 1 دقیقه در یک هموژنیزر فوق العاده توراکس (Omni Inteational ، GLH-02 ، Kennesaw ، ایالات متحده) یکدست شدند و عصاره ها در یک حمام آب در دمای 20 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه تکان خوردند. سه نمونه (1. 5 میلی لیتر) در 2500 گرم به مدت 15 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شدند و مایع رویی در دمای 4 درجه سانتیگراد تا تجزیه و تحلیل آنها ذخیره شد.

انواع توت ها: 5 گرم از هر توت با حلال استخراج 150 میلی لیتر مخلوط شد (استون: آب 70:30) (7،23). این مخلوط به مدت 5 دقیقه در یک هموژنیزر فوق العاده توراکس همگن شد و عصاره ها در یک حمام آب در دمای 20 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه تکان خوردند. سه نمونه (1. 5 میلی لیتر) در 2500 گرم به مدت 15 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شدند و مایع رویی در دمای 4 درجه سانتیگراد تا تجزیه و تحلیل آنها ذخیره شد.

تمام استخراج ها در 0-4 درجه سانتیگراد انجام شد تا تخریب به حداقل برسد.

تجزیه و تحلیل شیمیایی

الف) فنل های کل: با استفاده از روش رنگ سنجی شرح داده شده توسط Singleton و Rossi (24) مورد بررسی قرار گرفت. این شامل کاهش معرف Folin-ciocalteu توسط ترکیبات فنولیک ، با تشکیل همزمان یک مجموعه آبی است. به طور خلاصه ، یک مقدار از عصاره (0. 5 میلی لیتر) با 3 میلی لیتر آب مقطر و 0. 25 میلی لیتر معرف Folin-Ciocalteu مخلوط شد (Merck ، Darmstadt ، آلمان). بلافاصله ، 0. 75 میلی لیتر کربنات سدیم اشباع شده و 0. 95 میلی لیتر آب مقطر اضافه شد. این مخلوط به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شد و میزان جذب در 765 نانومتر در یک اسپکتروفتومتر UV-vis (Unicam Heλio α ، کمبریج ، انگلستان) اندازه گیری شد. اندازه گیری ها با یک منحنی استاندارد تهیه شده با محلول اسید گالیک (Sigma-Aldrich ، St. Louis ، MO ، USA) مقایسه شد و محتوای فنلیک کل به عنوان معادل اسید گالیک Mg در هر وزن خشک (Mg GAE/ G D. W.) بیان شد.

ب) آنتوسیانین ها: محتوای آنتوسیانین های مونومر از انواع توت ها و پوست سیب با استفاده از پروتکل pH دیفرانسیل اندازه گیری شد (25). از کلرید پتاسیم (0. 025 متر) و بافرهای سدیم استات (0. 4 متر) استفاده شد. پوست سیب مخلوط شد (5: 1 ، V: V) یا در کلرید پتاسیم (pH 1. 0) یا بافر سدیم استات (pH 4. 5). رقیق کردن عصاره ها در هر دو محلول بافر به شرح زیر بود: برای توت سیاه و زغال اخته 1: 5 (V: V) ، برای توت فرنگی 1: 2 (V: V) و برای تمشک 1: 1. 4 (V: V). جذب این مخلوط ها با استفاده از یک اسپکتروفتومتر U V-Vis در 520 و 700 نانومتر اندازه گیری شد. واحدهای جذب آنتوسیانین ها در نمونه ها (A) از: A = (A520 - A700) PH1. 0 - (A520- محاسبه شد. A700) PH4. 5 ، که در آن A520 و A700 مقادیر جذب در 520 و 700 نانومتر اندازه گیری می شوند.

محتوای آنتوسیانین ها به عنوان معادل استاندارد آنتوسیانین در هر 100 گرم وزن خشک بیان شد (میلی گرم آنتوسیانین/100 گرم D. W.). آنتوسیانین های استاندارد مختلف بسته به نمونه مورد تجزیه و تحلیل استفاده شد. بدین ترتیب ، برای پوست سیب سیانیدی ن-3 -گالاکتوزید (ε530 نانومتر = 34300 مت ر-1 سانتی مت ر-1 ، MW = 502. 5 گرم مو ل-1) استفاده شد. برای زغال اخته ، توت سیاه و توت فرنگی ما از سیانیدی ن-3 گلوکوزید (ε510 نانومتر = 26900 مت ر-1 سانتی مت ر-1 ، MW = 449. 2 گرم مو ل-1) استفاده کردیم ، در حالی که برای توت فرنگی از pelargonidin-3-glucoside استفاده می کردیم (ε530 nm = 22400 mm-1 سانتی مت ر-1 ، MW = 486. 5 گرم مو ل-1).

ج) سنجش FRAP: با توجه به بنزی و کرنش (17) با برخی اصلاحات انجام شد. در مرحله اول ، ما سنجش را در 22 درجه سانتیگراد انجام دادیم و ثانیا ، کاهش Fe 3+ - TPTZ طی 120 دقیقه دنبال شد. معرف FRAP از مخلوط سدیم استات (1020 میکرولیتر ، 300 میلی متر) pH 3. 6 ، TPTZ (100 میکرولیتر ، 10 میلی متر) و کلرید فریک (100 میکرولیتر ، 20 میلی متر) بدست آمد. معرف FRAP به طور روزانه تهیه می شد و با 10 میکرولیتر از هر عصاره مخلوط می شد. این واکنش در 593 نانومتر با استفاده از طیف سنج UV-VIS دنبال شد. frapindexes در 1 دقیقه (FRAP-1) ، 4 دقیقه (FRAP-4) ، 30 دقیقه (FRAP-30) و 120 دقیقه (FRAP-120) جوجه کشی به دست آمد ، با استفاده از یک منحنی استاندارد تولید شده توسط افزودن سولفات آهنبه معرف FRAP (0-60 میکرومتر). تمام نتایج به عنوان میکرومول آهن 2+ در هر گرم وزن خشک (میکرومول آهن +2 /گرم D. W.) بیان شد. علاوه بر این ، ظرفیت آنتی اکسیدانی FRAP یک استاندارد (اسید گالیک) تعیین شد. برای این منظور ، اسید گالیک در استون حل شد: آب (70:30) و واکنش در طی 60 دقیقه دنبال شد.

تحلیل آماری

تمام نتایج به عنوان میانگین + خطای استاندارد (SE) از سه نمونه گرفته شده تحت هر شرایطی که ارزیابی شده است بیان شد. تمام تجزیه و تحلیل ها به صورت سه گانه انجام شد. ارزیابی ها با تجزیه و تحلیل یک طرفه واریانس انجام شد و آزمون توکی-کرامر برای ایجاد تفاوت های قابل توجهی در بین میانگین انجام شد. تفاوت بین میانگین در سطح 5 ٪ (P

محتوای فنلیک کل پوست و خمیر کلیه ارقام سیب و انواع توت ها به ترتیب در شکل 1A و B نشان داده شده است. محتوای کل فنولیک به ارقام سیب و بافت میوه بستگی داشت. در سیب ، نمونه های پوستی نسبت به نمونه های خمیر 2. 5 تا 4. 8 برابر بیشتر از نمونه های پالپ نشان داد (P

محتوای فنولیک کل سیب و انواع توت ها

محتوای آنتوسیانین ها از پوست سیب و انواع توت ها به ترتیب در شکل 2A و B نشان داده شده است. از آنجا که خمیر سیب حاوی آنتوسیانین ها نیست ، این ترکیبات مورد تجزیه و تحلیل قرار نگرفتند (24). میانگین محتوای آنتوسیانین ها در پوست سیب از 75. 9 تا 2. 5 میلی گرم سیانیدین 3-گالاکتوزید/100 گرم D. W.(پ

محتوای کل آنتوسیانین سیب و انواع توت ها

Figure 3 shows the FRAP values of apple peel and pulp samples and berries (A and B, respectively). Apple peel exhibited higher FRAP in all the cultivars studied (p 2+ /g d.w. The decreasing antioxidant capacity order in the cultivars was: Granny Smith> Royal Gala> Red Delicious> Fuji> Pink Lady. FRAP values of apple pulp ranged from 267.0 to 206.5 μmol Fe 2+ /g d.w. Depending on the cultivar, the antioxidant capacity of apple peel was 2.4 to 1.8-fold higher than the respective values of the pulp. As shown in Fig 3B, FRAP of berries ranged from 157.5 to 90.8 μmoles Fe 2+ /g d.w. (p blueberries> strawberries>تمشک

مقادیر FRAP سیب و انواع توت ها

شکل 4 A و B به ترتیب دوره زمانی Fe 2+ - TPTZ را در سیب و انواع توت ها نشان می دهد. همانطور که در این ارقام مشاهده می شود ، FRAP با زمان جوجه کشی افزایش یافت. شکل 4a (فوقانی) پروفایل جنبشی پوست سیب را نشان می دهد. ظرفیت FRAP-120 پوست خوشمزه قرمز به ترتیب تقریباً 2. 6 و 1. 2 برابر بیشتر از مقادیر FRAP-1 و FRAP-30 بود. در سایر ارقام سیب ، FRAP-20 با نسبت پایین تر افزایش یافت. شکل 4a (پایین) پروفایل جنبشی تشکیل Fe 2+ -TPTZ در خمیر سیب را نشان می دهد. در این حالت ، تغییرات کوچکتر بین مقادیر FRAP به دست آمده پس از 1 ، 4 ، 30 یا 120 دقیقه واکنش مشاهده شد. شکل 4B وابستگی زمان ظرفیت آنتی اکسیدانی میوه های توت را نشان می دهد. همه انواع توت ها شاخص FRAP-20 را نشان دادند و مقادیر اولیه به دست آمده در 1 و 4 دقیقه را دو برابر می کنند. علاوه بر این ، در 120 دقیقه نتایج 1. 3 و 1. 4 برابر بیشتر از مقدار به دست آمده در 30 دقیقه بود. این نتایج نشان می دهد که توانایی آنتی اکسیدانی ، که با استفاده از روش FRAP ارزیابی می شود ، به زمان جوجه کشی بستگی دارد. در نتیجه ، ما بسته به زمان جوجه کشی ، استفاده از شاخص های مختلف FRAP را پیشنهاد می کنیم. بدین ترتیب ، از داده های نشان داده شده در شکل 4 ، یک FRAP-1 ، FRAP-30 و FRAP-20 ، به ترتیب پس از 1 دقیقه ، 30 دقیقه و 120 دقیقه واکنش ارزیابی شد. این شاخص ها برای سیب و انواع توت ها در جداول 1 نشان داده شده است.

دوره زمانی سازند Fe 2+ -tptz با واسطه عصاره های اپل (A) و انواع توت ها (B)

مقادیر FRAP پوست سیب و خمیر و انواع توت ها

جدول 2 نشان می دهد که FRAP-30 و FRAP-120 با کل فنولیک های موجود در نمونه های پوست سیب (به ترتیب 80/0 = r و 83/0) بسیار مرتبط بودند. با این حال ، مقدار FRAP استاندارد (FRAP-4) همبستگی ضعیفی را نشان داد ، نشان می دهد که در این شرایط وابستگی به فنل ها پایین تر است (R = 0. 56). FRAP-1 هیچ ارتباطی با محتوای فنولیک نشان نداد ، و نشان می دهد که تعیین در زمان اولیه جوجه کشی ، ظرفیت واقعی آنتی اکسیدانی را دست کم می گیرد. هیچ ارتباطی بین FRAP-4 و FRAP-1 با کل فنولیک در خمیر سیب مشاهده نشد. با این حال ، هنگامی که ما زمان جوجه کشی را افزایش دادیم ، این همبستگی ها به میزان قابل توجهی افزایش یافت. بنابراین ، همبستگی مشاهده شده بین FRAP-30 یا FRAP-20 با محتوای فنولیک به ترتیب 0. 53 و 0. 65 بود. نتایج مشابه در میوه های توت مشاهده شد ، زیرا همبستگی بین شاخص های FRAP و فنل های کل با زمان جوجه کشی افزایش یافته است.

ضرایب همبستگی (R) بین کل محتوای فنلیک و شاخص های FRAP

ضرایب همبستگی بین FRAP در مقادیر 1 ، 4،30 و 120 دقیقه و آنتوسیانین ها در جدول 3 نشان داده شده است. در پوست سیب ، این همبستگی به ترتیب در 30 و 120 دقیقه جوجه کشی معنی دار نبود (به ترتیب R = 0. 21 و 0. 29))وادبا مخالفت با آنچه با فنل های کل مشاهده شد ، همبستگی بین آنتوسیانین ها و FRAP با زمان جوجه کشی کاهش یافته است. نتایج مشابه در توت ها مشاهده شد ، نشان می دهد که آنتوسیانین های موجود در این میوه ها در زمان واکنش کوتاه تیتراسیون می شوند.

ضرایب همبستگی (R) بین محتوای آنتوسیانیا و FRAP

شکل 5 مشخصات جنبشی FRAP از خمیر سیب بانوی صورتی و توت سیاه را نشان می دهد. ظرفیت FRAP خمیر سیب به ترتیب 1. 6 و 1. 3 برابر بیشتر از توت سیاه در 1 و 4 دقیقه واکنش بود. با این حال ، هنگامی که FRAP-120 اندازه گیری می شود ، توت سیاه مقادیر 1. 4 برابر بالاتر از مقادیر پالپ سیب را نشان می دهد. اگر شاخص FRAP-30 را در نظر بگیریم ، این اثر بهتر نشان داده شده است: در این حالت ، پالپ سیب صورتی دارای 30 مقادیر 1. 4 برابر کمتر از بلک بری بود (جدول 1).

دوره زمانی سازند Fe 2+ -tptz با واسطه پالپ سیب صورتی و توت سیاه

کل فنولیک های اندازه گیری شده در ارقام مختلف سیب مطابق با گزارش های قبلی است که نشان می دهد بخش لایه برداری حاوی مقادیر بیشتری از این ترکیبات نسبت به سایر قسمتهای خوراکی این میوه است (10،26-29). بسته به رقم ، فنولیک های موجود در پوست سیب از دو تا پنج برابر نسبت به کسری پالپ مربوطه (27،28،30) متغیر است. در توافق با Tsao و همکاران.(26) ، پوست خوشمزه قرمز بالاترین محتوای فنولیک را به نمایش گذاشت. محتوای آنتوسیانین های پوست سیب با ظاهر آنها همراه است (27) ، و سیب های خوشمزه قرمز ، با رنگ قرمز عمیق ، بالاترین مقادیر را به نمایش می گذارند. این رنگ عمدتا به وجود ترکیبی از گلیکوزیدهای سیانیدین نسبت داده می شود ، که از آن سیانیدین 3- گالاکتوزید اصلی است و به دنبال آن اثری از سیانیدین 3-گلوکوزید ، 3-آرابینوزید ، 3-xyloside و 7-arabinoside (26 ، 26 ،27)

در توافق با نتایج ما ، هانونن و همکاران.(23) و وو و همکاران.(4) نشان داد که توت سیاه بالاترین میزان کل فنولیک را نشان می دهد ، در حالی که وو و همکاران.(4) گزارش داد که زغال اخته در مقایسه با توت سیاه و توت فرنگی از ارزش کم برخوردار است. از طرف دیگر ، رتبه بندی مشاهده شده در محتوای آنتوسیانین ها در نمونه های توت با کالت و همکاران مطابقت دارد.(31). به طور مشابه ، وانگ و لین (32) گزارش دادند كه توت سیاه نسبت به تمشک و توت فرنگی محتویات آنتوسیانین بالاتری دارند.

FRAP روشی مناسب است که به طور گسترده ای برای تخمین ظرفیت آنتی اکسیدانی ترکیبات خالص و همچنین مخلوط های پیچیده مانند میوه و سبزیجات استفاده می شود. همانطور که قبلاً گفته شد ، سنجش FRAP ظرفیت کل یک نمونه را برای کاهش Fe 3+ به Fe 2+ پس از 4 دقیقه (FRAP-4) اندازه گیری می کند و چنین توانایی کاهش دهنده ای را به ظرفیت کل آنتی اکسیدانی نمونه برابر می کند. نتایج به دست آمده در FRAP-4 نشان می دهد که پوست سیب دارای آنتی اکسیدان های بسیار واکنشی است که با نتایج قبلی مطابقت دارد (10،29،30،33). جالب اینجاست که Chinnici و همکاران.(34) ظرفیت آنتی اکسیدانی پوست سیب (کپی کردن آنهایی که در پالپ سیب) با غلظت بالای فیتوشیمیایی مانند گلیکوزیدهای کوئرستین و پروکانیدین ها همراه بود. رقم سیب که بالاترین مقدار FRAP را در 30 و 120 دقیقه نشان می دهد ، خوشمزه قرمز بود که با مقادیر گزارش شده توسط Tsao و همکاران مطابقت دارد.(33) و لوتیتو و فری (35) در عصاره های سیب. بسته به رقم ، ظرفیت های آنتی اکسیدانی پوست سیب 2. 4 تا 1. 8 برابر بیشتر از مقادیر پالپ مربوطه بود. این نسبت ها با وولف و همکاران مطابقت دارند.(27) ، دروگودی و همکاران.(28) ، و Chinnici و همکاران.(34). با توجه به ترکیبات محافظتی بهداشتی که در پوست سیب یافت می شود ، این بخش ممکن است به اشکال مختلف به عنوان منبع ارزشمندی از فنولیک های آنتی اکسیدانی طبیعی مصرف شود و از یک ماده با ارزش در فرمولاسیون غذاهای کاربردی استفاده بالقوه دارد (36).

ظرفیت بالای آنتی اکسیدانی توت سیاه به محتوای آنها از اسیدهای فنولیک و آنتوسیانین ها ، که دارای فعالیت آنتی اکسیدانی قوی هستند (16) نسبت داده می شود. ترتیب رتبه بندی مقادیر FRAP-4 مشاهده شده در انواع توت ها با گزارش های قبلی سازگار است (37). با این حال ، پلگرینی و همکاران.(16) و هالوورسن و همکاران.(38) سفارش متفاوتی را گزارش کردند. این احتمالاً با خصوصیات ژنتیکی (ارقام) ، عوامل محیطی ، شیوه های زراعی ، بلوغ و/یا شرایط پس از برداشت همراه است ، که همه آنها بر قانون اساسی شیمیایی آنها تأثیر می گذارد و بنابراین ، محتوای آنتی اکسیدان آنها (8،39).

روش FRAP با توجه به ارزیابی جذب قابل مشاهده (در 593 نانومتر) از مجموعه آهن 2+ -TPTZ پس از 4 دقیقه واکنش پیشنهاد شده است. این نقطه پایان با تثبیت جذب مجتمع آهنی همراه است (17). با این حال ، هنگامی که این شرایط به نمونه های سیب و توت اعمال شد ، افزایش مداوم جذب در 593 نانومتر مشاهده شد. بنابراین ، مقادیر FRAP وابستگی شدیدی به زمان جوجه کشی نشان داد. در واقع ، میانگین مقادیر اولیه FRAP-1 و FRAP 120 از 390 تا 760 و 100 تا 280moles fe 2+ /g D. W برای سیب و انواع توت ها به ترتیب است. این مقادیر FRAP-1 ممکن است مربوط به وجود آنتی اکسیدان های بسیار کارآمد مانند اسید اسکوربیک ، کوئرستین و کاتچین باشد (18،20،40). هنگامی که ما دوره جوجه کشی بیش از 4 دقیقه را اعمال کردیم ، مقادیر FRAP به طور قابل توجهی متفاوت بود (P

هنگامی که واکنش ها اجازه رسیدن به تعادل را نداشته باشند ، ممکن است FRAP به دلیل تولید آنتی اکسیدان های جدید از طریق پلیمریزاسیون فنولیک هایی که به کل ظرفیت آنتی اکسیدانی کمک می کنند ، دست کم گرفته شود. با توجه به مخلوط پیچیده ترکیبات آنتی اکسیدانی موجود در میوه ها و سبزیجات ، مهم است که دوره ها به اندازه کافی طولانی بتوانند هنگام مقایسه ظرفیت کل آنتی اکسیدانی خود به تعادل برسند. در واقع ، پس از 60 دقیقه ، سینتیک واکنش FRAP اسید گالیک پس از 1 و 4 دقیقه به طور قابل توجهی (به ترتیب 1. 4 و 1. 3 بار در 1 و 4 دقیقه ، به ترتیب) افزایش یافت زیرا کاهش مجتمع-TPTZ بدون وقفه بود (داده ها نشان داده نشده است)وادپولیدو و همکاران.(18) نتایج مشابهی را گزارش کرد ، تعیین کرد که ظرفیت آنتی اکسیدانی پس از 30 دقیقه کپی شده است ، در حالی که نمونه های خالی هیچ گونه اصلاح جذب در این زمان جوجه کشی را نشان نمی دهد ، تأیید می کند که افزایش در مقادیر جذب ناشی از تغییر مخلوط واکنش نیستبا زمان. این واقعیت که تمام نمونه های سنجیده شده (عصاره سیب و انواع توت ها ، محلول اسید گالیک) ظرفیت کاهش آنها را با زمان جوجه کشی افزایش داده است ، احتمالاً نشان دهنده توانایی گونه های آنتی اکسیدانی برای فعال ماندن است. در سیستم های غذایی این فرایند در طی یک دوره طولانی محافظت می کند و بنابراین ، به پیشگیری از وخامت اکسیداتیو اولیه کمک می کند (41). از طرف دیگر ، اگر این مولکول ها وضعیت کافی آنتی اکسیدانی را در داخل بدن حفظ کنند ، آنها می توانند بافت ها را در برابر آسیب اکسیداتیو ناشی از رادیکال های آزاد محافظت کنند.

وابستگی زمان FRAP ممکن است به دلیل وجود فنلیک ها با واکنش پذیری متفاوت (مولکول های آنتی اکسیدانی با واکنش سریع ، متوسط و کند) که به طور مستقل تعامل دارند ، و/یا ، به نرخ های مختلف واکنش فنل های آهن 3+ -tptz همراه باشد. حضور متابولیت هایی که نسبت به مجتمع Fe 3+ -TPTZ بسیار واکنش پذیر هستند. به طور مستقل از دلایل اساسی وابستگی زمان FRAP ، مقادیر به دست آمده در 4 دقیقه جوجه کشی ، ظرفیت کل آنتی اکسیدانی نمونه ها را نشان نمی دهد. این پشتیبانی می شود از آنجا که شاخص های FRAP-30 و FRAP-120 پوست سیب به طور قابل توجهی و قوی با کل محتوای فنلیک ارتباط دارد. بنابراین ، به منظور تعیین رتبه نسبی از ظرفیت آنتی اکسیدانی نمونه های مختلف ، لازم است که پروفایل های جنبشی سازند Fe 2+ -TPTZ را بشناسیم. علاوه بر این ، همبستگی های ضعیف مشاهده شده بین FRAP-1 و FRAP-4 و فنل های کل پوست سیب نشان می دهد که این ترکیبات دارای واکنش پذیری متفاوتی هستند. نتایج ما نشان می دهد که همه آنتی اکسیدان ها قادر به کاهش سریع FE + 3-TPTZ نیستند تا بتوانند واکنش را در مدت زمان کوتاهی تکمیل کنند. به همین دلیل ، هنگامی که ما زمان جوجه کشی این نمونه ها را با معرف FRAP افزایش دادیم ، این همبستگی ها به طور قابل توجهی افزایش یافته است (FRAP-30 و FRAP-20) ، نشان می دهد که این عصاره ها حاوی مخلوط پیچیده ای از فنولیک ها هستند که واکنش کمتری دارند ، بنابراین نیاز به طولانی تر دارند. زمان کاهش Fe + 3-tptz به شکل آهنی. نتایج مشابه در توت ها به دست آمد. همبستگی های کم مشاهده شده نشان می دهد که ترکیبات غیر از فنولیک ، مانند آنتی اکسیدان های ویتامین و/یا هم افزایی در بین این ترکیبات و فنولیک ها به ظرفیت آنتی اکسیدانی نمونه ها کمک می کنند (18،41).

روش FRAP باید دوره های جوجه کشی را به اندازه کافی طولانی در نظر بگیرد تا واکنش کلیه آنتی اکسیدان های مختلف موجود در عصاره ها امکان پذیر باشد. در غیر این صورت ، ظرفیت کل آنتی اکسیدانی دست کم گرفته می شود. شکل 5 نشان می دهد که مقدار FRAP-4 پالپ سیب بانوی صورتی بالاتر از مقدار بلک بری بود ، در حالی که برعکس در شاخص FRAP-120 مشاهده می شود ، جایی که مقدار اندازه گیری شده در بلک بری 1. 4 برابر بیشتر از خمیر سیب است. بنابراین ، هنگامی که نتیجه گیری از نتایج FRAP در یک زمان واحد از واکنش نمونه آهن 3+ - TPTZ تخمین زده می شود ، باید مراقبت های شدید انجام شود.

نتیجه گیری

مقادیر FRAP عصاره های سیب و توت به شدت به زمان جوجه کشی بستگی دارد. بنابراین ، شاخص FRAP که در 4 دقیقه ارزیابی شده است (روش استاندارد) لزوماً ظرفیت کل آنتی اکسیدانی این نمونه ها را منعکس نمی کند. این بدان معنی است که تعیین ظرفیت کل آنتی اکسیدانی این عصاره های میوه ، که از طریق روش FRAP ارزیابی می شود ، به دوره های طولانی تر جوجه کشی نیاز دارد. در واقع ، مقادیر FRAP به دست آمده در زمان های مختلف جوجه کشی (به اصطلاح FRAP-1 ، FRAP-4 ، FRAP-30 و FRAP-20 ، با توجه به زمان جوجه کشی مورد استفاده) برای نمونه های مختلف نتایج متناقض ایجاد می کند. در نتیجه ، یک پروفایل FRAP جنبشی باید برای هر نوع نمونه مورد تجزیه و تحلیل به منظور ایجاد مناسب ترین دوره جوجه کشی برای تیتراژ تمام گونه های آنتی اکسیدانی واکنشی تحقق یابد.

سپاسگزاریها

نویسندگان مایل به تصدیق Conicyt (Comisión Nacional de Investigación Científica y Tecnológica ، شیلی) برای بورس تحصیلی به C. Henríquez هستند.

1. Lampe J. اثرات سلامتی سبزیجات و میوه ها: ارزیابی مکانیسم های عمل در مطالعات تجربی انسان. Am J Clin Nutr. 1999 ؛70: 475S-490s.[پیوندها]

2. Arts I ، Hollman P. Polyphenols و خطر بیماری در مطالعات اپیدمیولوژیک. Am J Clin Nutr. 2005 ؛81: 317s- 325s.[پیوندها]

3. Halliwell B ، Gutteridge J. رادیکال های آزاد در زیست شناسی و پزشکی ؛انتشارات دانشگاه آکسفورد: نیویورک ؛2000. [پیوندها]

4- Wu X ، Beecher G ، Holden J ، Haytowitz D ، Gebhardt S ، R. R. Lipophilic و آنتی اکسیدانی آبگریز غذاهای مشترک در ایالات متحده. J Agr Food Chem. 2004 ؛52: 4026-4037.[پیوندها]

5. پروفایل اسید فنولیک در برخی از انواع توت های کوچک ، Zadeowski R ، Naczk M ، Nesterowicz J. J Agr Food Chem. 2005 ؛53: 2118-2124.[پیوندها]

6. Häkkinen S ، Heinonen M ، Kärenlampi S ، Mykkänen H ، Ruuskanen J ، Torrönen R. غربالگری فلاونوئیدهای منتخب و اسیدهای فنولیک در 19 توت. مواد غذایی res int. 1999 ؛32: 345-353.[پیوندها]

7. Kähkönen M ، Hopia A ، Heinonen M. Berry Fenolics و فعالیت آنتی اکسیدانی آنها. J Agr Food Chem. 2001 ؛49: 4076-4082.[پیوندها]

8. Boyer J ، Liu RH. فیتوشیمیایی اپل و فواید سلامتی آنها. Nutr J. 2004 ؛3: 5.[پیوندها]

9. Ehala S ، Vaher M ، Kaljurand M. خصوصیات پروفایل های فنولیک توت های اروپای شمالی با الکتروفورز مویرگی و تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی آنها. J Agr Food Chem. 2005 ؛53: 6484-6490.[پیوندها]

10. Khanizadeh S ، Tsao R ، Rekika D ، Yang R ، Charles MT ، Rupasinghe H. ترکیب پلی فنول و ظرفیت کل آنتی اکسیدانی ژنوتیپ های سیب منتخب برای پردازش. J Food Compos Anal. 2008 ؛21: 396- 401. [پیوندها]

11. Pantelidis GE ، Vasilakakis M ، Manganaris GA ، Diamantidis G. ظرفیت آنتی اکسیدانی ، فنل ، آنتوسیانین و اسید اسید آسکوربیک در تمشک ، توت سیاه ، گلدان های قرمز ، انگورستان و گیلاس کرنلی. شیمی غذایی2007 ؛102: 777-783.[پیوندها]

12. Knekt P ، Kumpulainen J ، Järvinen R ، Rissanen H ، Heliövaara M ، Reunanen A ، et al. مصرف فلاونوئید و خطر ابتلا به بیماری های مزمن. Am J Clin Nutr. 2002 ؛76: 560 568. [پیوندها]

13. Rissanen T ، Voutilainen S ، Virtanen J ، Venho B ، Vanharante M ، Mursu J ، et al. کم مصرف میوه ها ، انواع توت ها و سبزیجات با مرگ و میر بیش از حد در مردان همراه است: مطالعه فاکتور خطر ابتلا به بیماری قلبی کوپیو (KIHD). J Nutr. 2003 ؛133: 199-204.[پیوندها]

14. Scalbert A ، Manach C ، Morand C ، Rémésy C. پلی فنول های رژیم غذایی و پیشگیری از بیماری ها. Crit Rev Food Sci Nutr. 2005 ؛45: 287-306.[پیوندها]

15. روشهای استاندارد شده برای تعیین ظرفیت و فنولیک های آنتی اکسیدانی در غذاها و مکمل های غذایی. J Agr Food Chem. 2005 ؛53: 4290-4302.[پیوندها]

16. Pellegrini N ، Serafíni M ، Colombi B ، Del Rio D ، Salvatore S ، Bianchi M ، et al. ظرفیت کل آنتی اکسیدانی غذاهای گیاهی ، نوشیدنی ها و روغنهای مصرف شده در ایتالیا توسط سه روش مختلف آزمایشگاهی ارزیابی شده است. J Nutr. 2003 ؛133: 2812-2819.[پیوندها]

17. Benzie I ، Strain J. توانایی کاهش آهن پلاسما (FRAP) به عنوان اندازه گیری قدرت آنتی اکسیدانی: روش FRAP. بیوشیم مقعد. 1996 ؛239: 70-76.[پیوندها]

18. Pulido R ، Bravo L ، Saura-Calixto F. فعالیت آنتی اکسیدانی پلی فنول های رژیم غذایی که توسط یک سنجش قدرت کاهش دهنده/آنتی اکسیدانی فریک اصلاح شده تعیین می شود. J Agr Food Chem. 2000 ؛48: 3396-3402.[پیوندها]

19. Antolovich M ، Prenzler P ، Patsalides E ، McDonald S ، Robards K. روش های آزمایش فعالیت آنتی اکسیدانی. تحلیلگر2002 ؛127: 183-198.[پیوندها]

20. Ozgen M ، Reese N ، Tulio A ، Scheerens J ، Miller R. اصلاح شده 2،2-Azino-3-Ethylbenzothiazoline-6- اسید سولفونیک (ABTS) برای اندازه گیری ظرفیت آنتی اکسیدانی از میوه های کوچک منتخب و مقایسه با فریککاهش قدرت آنتی اکسیدانی (FRAP) و روش های 2،2'-diphenyl- 1-picrylhydrazyl (DPPH). J Agr Food Chem. 2006 ؛54: 1151-1157.[پیوندها]

21. انجمن شیمی دانان تحلیلی رسمی. 2006. روشهای رسمی تجزیه و تحلیل. هجدهم وی. گیتسبورگ ، MD: AOAC Inteational ، 2000 ص.[پیوندها]

22. Vrhovsek U ، Rigo A ، Tonon D ، Mattivi F. کمیت پلی فنول ها در انواع مختلف سیب. J Agric Food Chem. 2004 ؛52: 6532-6538.[پیوندها]

23. Heinonen M ، Meyer A ، Frankel E. فعالیت آنتی اکسیدانی فنلیک های توت بر روی لیپوپروتئین با چگالی کم انسان و اکسیداسیون لیپوزوم. J Agr Food Chem. 1998 ؛46: 4107-4112.[پیوندها]

24. Singleton V ، Rossi J. رنگ سنجی کل فنولیک ها با معرفهای اسید فسفوتونگستیک فسفومولیبدیک. Am J Enol Viticult. 1965 ؛16: 144-158.[پیوندها]

25. Cheng G ، Breen P. فعالیت فنیل آلانین آمونیالیست (PAL) و غلظت آنتوسیانین ها و فنلیک ها در ایجاد میوه توت فرنگی. J Am Soc Hort Sci. 1991 ؛116: 865-869.[پیوندها]

26. Tsao R ، Yang R ، Young JC ، Zhu H. پروفایل های پلی فنولی در هشت رقم سیب با استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC). J Agr Food Chem. 2003 ؛51: 6347-6353.[پیوندها]

27. Wolfe K ، Wu X ، Liu R. فعالیت آنتی اکسیدانی پوست سیب. J Agr Food Chem. 2003 ؛51: 609-614.[پیوندها]

28. Drogoudi P ، Michailidis Z ، Pantelidis G. Peel و محتوای آنتی اکسیدانی گوشت و ویژگی های کیفیت برداشت از هفت رقم سیب. SCI HORTIC. 2008 ؛115: 149 - 153. [پیوندها]

29. Vieira F ، Borges G ، Copetti C ، Gonzaga L ، Nunes E ، Fett R. فعالیت و محتوای آنتی اکسیدان های پلی فنولی در کل میوه ، گوشت و پوست سه رقم سیب. Arch Latinoamer Nutr. 2009 ؛59: 101-106.[پیوندها]

30. Hassimotto NM ، Genovese MI ، Lajolo F. فعالیت آنتی اکسیدانی میوه های رژیم غذایی ، سبزیجات و خمیر میوه های منجمد تجاری. J Agr Food Chem. 2005 ؛53: 2928- 2935. [پیوندها]

31. Kalt W ، Foey C ، Martin A ، Prior R. آنتی اکسیدان ، ویتامین C ، فنولیک ها و آنتوسیانین ها پس از ذخیره تازه میوه های کوچک. J Agr Food Chem. 1999 ؛47: 4638-4644.[پیوندها]

32. Wang S ، Lin H. فعالیت آنتی اکسیدانی در میوه ها و برگ های توت سیاه ، تمشک و توت فرنگی با رقم و مرحله رشد متفاوت است. J Agr Food Chem. 2000 ؛48: 140-146.[پیوندها]

33. Tsao R ، Yang R ، Xie S ، Sockovie E ، Khanizadeh S. کدام ترکیبات پلی فنولی در کل فعالیت های آنتی اکسیدانی سیب نقش دارند. J Agr Food Chem. 2005 ؛53: 4989-4995.[پیوندها]

34. Chinnici F ، Bendini A ، Gaiani A ، Riponi C. فعالیت های اساسی رادیکال پوست و خمیر از CV. سیب های خوشمزه طلایی مربوط به ترکیب فنلی آنها است. J Agr Food Chem. 2004 ؛52: 4684-4689.[پیوندها]

35. Lotito S ، Frei B. ارتباط پلی فنول های سیب به عنوان آنتی اکسیدان در پلاسما انسان: متضاد در شرایط آزمایشگاهی و در داخل بدن. Bio Med رادیکال آزاد. 2004 ؛36: 201- 211. [پیوندها]

36. Henríquez C ، Speisky H ، Chiffelle I ، Valenzuela T ، Araya M ، Simpson R ، Almonacid S. تهیه یک ماده حاوی پوست سیب ، به عنوان منبع پلی فنول ها و فیبر رژیم غذایی. J Sci Food. 2010 ؛75: H172- H181.[پیوندها]

37. Halvorsen B ، Holte K ، Myhrstad M ، Barikmo I ، Hvattum E ، Fagertun S ، et al. غربالگری منظم از آنتی اکسیدان های کل در گیاهان رژیم غذایی. J Nutr. 2002 ؛132: 461- 471. [پیوندها]

38. Halvorsen B ، Carlsen M ، Phillips K ، Bøhn S ، Holte K ، Jacobs D ، et al. محتوای ترکیبات فعال ردوکس (یعنی آنتی اکسیدان ها) در غذاهای مصرف شده در ایالات متحده. Am J Clin Nutr. 2006 ؛84: 95-135.[پیوندها]

39. Tomás-Barberán F ، Espín J. ترکیبات فنلی و آنزیم های مرتبط به عنوان عوامل تعیین کننده کیفیت در میوه ها و سبزیجات. J Sci Food Agric. 2001 ؛81: 853-876.[پیوندها]

40. Janaszewska A ، Bartosz G. سنجش ظرفیت کل آنتی اکسیدانی: مقایسه چهار روش که در پلاسما خون انسان اعمال می شود. Scand J Clin Lab Inves. 2002 ؛62: 231-236.[پیوندها]

41. Imeh U ، Khokhar S. توزیع فنل های کونژوگه و آزاد در میوه ها: فعالیت آنتی اکسیدانی و تغییرات رقم. J Agr Food Chem. 2002 ؛50: 6301-6306.[پیوندها]

آپارتادو 62. 778 ، Chacao Caracas 1060 ، Venezuela ، S. A. نمابر: (58. 212) 286. 00. 61